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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

血管內(nèi)皮生長因子測定試劑盒

產(chǎn)品型號:96、48份/盒

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

所在地:北京市

更新時間:2023-07-12

產(chǎn)品簡介:

血管內(nèi)皮生長因子測定試劑盒用于體外定量測定人血清中的血管內(nèi)皮生長因子的含量。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病發(fā)展過程中,血管內(nèi)皮生長因子是重要的誘導(dǎo)物質(zhì),在其他血管新生類疾病中血管內(nèi)皮因子含量也有顯著升高。

產(chǎn)品特性Product characteristics
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產(chǎn)品名稱:血管內(nèi)皮生長因子測定試劑盒


試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的:血管內(nèi)皮生長因子測定試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本 


試劑盒組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。



操作流程:

(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。

(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 

(6)洗板,同(4)。 

(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 

(9)洗板,同(4)。 

(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。


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